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本標(biāo)準(zhǔn)包含水解-提取法、酯交換法兩套前處理方案，適配不同食品基質(zhì)，全程參照安安網(wǎng)國標(biāo)規(guī)范操作，具體流程如下：
一、試樣預(yù)處理
固體樣品經(jīng)粉碎、研磨、過篩制成均勻細(xì)粉；肉類、果蔬樣品采用均質(zhì)機(jī)勻漿處理。液體樣品（乳類、飲料、油脂）檢測前充分搖勻混勻；高水分樣品低溫冷凍保存，檢測前回溫復(fù)溶。深海魚、堅(jiān)果、嬰幼兒食品等易氧化樣品，全程避光操作，添加焦性沒食子酸，避免不飽和脂肪酸氧化降解。
二、第一法：水解-提取法（通用內(nèi)標(biāo)法，絕大多數(shù)食品適用）
1.樣品稱量
取250mL平底燒瓶，精確稱取0.1~10g均勻樣品，控制體系總脂肪含量在100~200mg，稱量精度0.1mg。依次加入2.0mL十一碳酸甘油三酯內(nèi)標(biāo)溶液、100mg焦性沒食子酸、數(shù)粒沸石，再添加2mL95%乙醇與4mL純水，混勻備用，依據(jù)樣品類型選擇對應(yīng)水解方式。
2.恒溫水浴水解（水浴溫度70~80℃）
酸水解（肉、谷物、糕點(diǎn)等普通食品，乳制品除外）：加入10mL鹽酸溶液，水浴水解40min，每10min振蕩一次，冷卻至室溫。
堿水解（液態(tài)乳、乳粉、嬰幼兒配方乳粉）：加入5mL氨水，水浴水解20min，每5min振蕩一次，冷卻至室溫。
酸堿水解（奶酪、乳酪）：先加氨水水解20min，再加鹽酸繼續(xù)水解20min，定時(shí)振蕩，冷卻至室溫。
3.脂肪萃取與濃縮
水解液中加入10mL95%乙醇破乳，全部轉(zhuǎn)移至分液漏斗，用乙醚-石油醚（1:1）混合液多次沖洗燒瓶，洗液一并并入。劇烈振搖5min，靜置分層10min，收集上層有機(jī)相；水相重復(fù)萃取3次，合并所有醚層。40~45℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干燥，獲得粗脂肪。
4.皂化與甲酯化
粗脂肪中加入8mL 2%氫氧化鈉甲醇溶液，80℃水浴回流至無油滴，完成皂化；再加入7mL 15%三氟化硼甲醇溶液，回流2min。冷卻后加入正庚烷萃取，靜置分層后取上層有機(jī)相，無水硫酸鈉脫水澄清，上清液即可上機(jī)氣相色譜檢測，濃度偏高可適度稀釋。
三、第二法：酯交換法（純動(dòng)植物油脂專用）
無需水解和脂肪提取，直接稱取60mg油脂于螺口試管，依次加入2mL內(nèi)標(biāo)液、4mL異辛烷，振蕩溶解；添加0.2mL甲醇鈉甲醇溶液，密閉混勻后室溫靜置15min完成酯交換。加入飽和氯化鈉溶液分層，取上層有機(jī)相脫水后直接上機(jī)檢測。
四、關(guān)鍵注意事項(xiàng)
全程通風(fēng)櫥操作，遠(yuǎn)離明火；三氟化硼甲醇具備腐蝕性，需做好個(gè)人防護(hù)；嚴(yán)控水浴溫度，防止脂肪酸降解；旋蒸切勿過度加熱，物料發(fā)黃即氧化失效，需重新檢測。
簡易流程：樣品預(yù)處理→稱樣加試劑→分類水解→有機(jī)溶劑萃取→旋蒸濃縮→皂化甲酯化→萃取脫水→GC上機(jī)檢測
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